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北京瓶裝異丙醇廠家直批:HPLC柱前衍生相關問題

發布時間:2021-10-12

北京瓶裝異丙醇廠家直批彪仕奇:HPLC柱前衍生和柱后衍生的相關問題?為什么要衍生?衍生化的分類?進行衍生,適用的化合物有哪些?進行衍生化的要求有哪些?柱前衍生和柱后衍生的優缺點?

色譜技術中的化學衍生法系指在色譜過程中用特殊的化學試劑(一般稱為衍生化試劑或標記試劑)使樣品成分轉變相應的衍生物之后進行分離檢測或進行檢測的方法。目的為:1.將紫外—可見強吸收功能基團引入被檢測對象或將其轉變為熒光衍生物,以提高檢測靈敏度;2.提高對分析樣品的分離和選擇性。

從是否與HPLC系統聯機的角度,化學衍生法分為在線與離線兩種。從發生衍生化的場合,分為柱前衍生法與柱后衍生法兩種。目前,在HPLC中,以離線的柱前衍生法(簡稱柱前衍生法)與在線的柱后衍生法(簡稱柱后衍生法)使用居多。

普通的C18柱能作為正相色譜柱使用嗎?正相色譜體系中最常用也最普通的是那種色譜柱。正相柱在使用過程中與反向柱相比有什么需要注意的地方?

普通C18柱作為正相柱使用,我還沒聽說過。正相色譜分離模式是指固定相的極性比流動相的極性大,反過來,流動相極性大就是反相。C18固定相屬于疏水性相對比較強的,疏水性強就是極性很弱,應該找不出極性比它更弱的流動相了。

正相體系常見的柱子有:硅膠柱、氨基柱、CN基柱和Diol二醇基柱,最普通的應該就是硅膠柱。正相柱和反相柱比,最需要注意的是水分,正相柱對水分非常敏感,流動相中水分含量的些微變化對保留時間影響很大,因此正相柱測定前平衡時間需要幾個小時甚至更長。

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